主演：沙梅克·摩尔 杰克·约翰逊 海莉·斯坦菲尔德 马赫沙拉·阿里 布莱恩·泰里·亨利 莉莉·汤姆林 劳伦·维勒斯 佐伊·克罗维兹 约翰·木兰尼 贵美子·格伦 尼古拉斯·凯奇 凯瑟琳·哈恩 列维·施瑞博尔 克里斯·派恩 娜塔丽·莫瑞丝 奥斯卡·伊萨克 格里塔·李 斯坦·李 乔玛·塔科内 华金·科西奥 蕾克·贝尔 梅勒妮·海恩斯 尼克·杰恩 穆尼卜·拉赫曼 卡洛斯·萨拉戈萨 黛西·罗斯·布莱内斯 里夫·霍顿 哈里森·奈特 莱克斯·朗 凯特琳·麦肯纳-威尔金森 斯科特·门维尔 克里斯托弗·米勒 德维卡·帕利赫 柯特
正就读中学的少年迈尔斯（沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音）意外被一只遭受放射性污染的蜘蛛咬伤，随后身体发生奇特的变化。偶然机缘，他目睹了蜘蛛侠（克里斯·派恩 Chris Pine 配音）和犯罪头目金并（列维·施瑞博尔 Liev Schreiber 配音）的战斗。为了阻止金并利用时空对撞机扰乱宇宙，蜘蛛侠最终壮烈牺牲。可未过多久，来自平行宇宙的颓废的彼德·帕克（杰克·约翰逊 Jake M. Johnson 配音）出现在迈尔斯面前。为了阻止金并的阴谋，并帮助这个帕克返回自己的宇宙，他们闯入金并的老巢。在这一过程中，二人遭到章鱼博士和徘徊者的狙击。与此同时，来自其他宇宙的女蜘蛛侠、暗影蜘蛛侠、蜘猪侠、二次元蜘蛛妹相继出现。 他们合力与恶势力展开斗争……
